制作白僵蚕,首先必须具备养殖的蚕源和白僵菌的菌种,然后才可以分离培养和按种,从而制出僵蚕。
(1)取得白僵菌种:白僵菌可以向有关单位引种,也可以自己选择性地分离培养。分离方法是:选择病死后比较僵硬,体节凹陷处或全身覆盖有白色粉状物或毛状物的僵蚕,进行培养基的分离培养。分离培养的培养基可选择马铃薯洋菜培养基。配制培养基时可以先将洗净的马铃薯200克放置0.1%的升汞液中浸30分钟。再洗净去皮,切成方块装入烧瓶内,加清水1千毫升,煮成汁水过滤。加入15-20克洋菜于汁水中,并加热使洋菜溶解。然后加入20克葡萄糖,过滤,将滤液装入试管内进行高压灭菌消毒30分钟。取出后使其凝成斜面即可。培养基制备后,可在酒精灯火焰旁打开斜面试管棉塞,把僵蚕投入试管内塞上棉塞,然后摇动试管,使僵蚕体表的白僵菌孢子或菌丝沾附于培养基斜面上。再在火焰旁打开试管棉塞取出僵蚕,塞好棉塞,放置25-28℃的地方培养。既要通气又要保持一定温度,才能适宜白僵菌的生长繁殖。一般培养三天半就可长好,慢的约需十余天才能长好。在培养过程中,同时可选择白僵菌菌株长势较好的斜面,再用接种针转接到其他试管扩大培养。
(2)接种:白僵菌种培养好,就可接种于蚕体。蚕体以五龄幼蚕(吐丝作茧前的熟蚕)进行接种为好。接种可分穿刺法和喷撒法两种。
穿刺法:用培养基菌种2份加无菌水1份调成悬浊液,装入小皿中,用7号缝衣针醮取悬浊液,在蚕体后部9-10环节间榻皱处,轻轻剌一下,以刺破皮为度。要逐条进行接种。操作过程中必须注意彻底消毒,避免感染杂菌。为了保证接种质量,悬浮菌液要勤换,做到穿刺一条醮一下菌液,直到穿刺完毕。
喷撒法:选择3-15条僵蚕,浸于1000毫升的无菌水中,使僵蚕的白僵菌孢子全部脱落于水中,调成均匀的悬浮液。用喷雾器喷洒在五龄蚕体上.每匾约喷撒200毫升左右。喷撒时要注意均匀,不要遗漏。调制的悬浮液要立即使用,不要超过6小刚,以免失效。喷洒完后饲喂桑叶,24小时内要保持多湿状态,方能提高感染率。
(3)接种后的管理;接种后,蚕体感染自僵菌初期病情不明显,必须在不浪费桑叶的原则下,使蚕吃饱,促使蚕体长大,绢丝腺发达,以保证僵叠质量。后期发生僵死,但要注意检查翻动,避免蚕与蚕、蚕与匾之间发生粘连、结块现象。同时,拣去因其他病而死的蚕体。检查翻动一般进行三次即可。第一次翻动在J1体发硬后;第二次可在蚕体上初见菌丝时翻动;第三次在菌丝长好后再翻动一次。
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