体细胞核移植又称体细胞克隆,原理即细胞核的全能性,是动物细胞工程技术的常用技术手段。方法如下。
1、细胞核的采集和卵母细胞的准备
从供体身体的某一部位上取体细胞,并通过体细胞培养技术对该体细胞进行增殖。
采集卵母细胞,体外培养到减数第二次分裂中期,通过显微操作去除卵母细胞中的核,由于减二中期细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管可以一并吸出细胞核和第一极体。
2、细胞促融
将供体细胞注入去核卵母细胞通过电刺激使两细胞融合,供体细胞进入受体卵母细胞内构建重组胚胎,通过物理或化学方法(如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活受体细胞,使其完成细胞分裂和发育进程。
3、植入代孕母体
体外完成早期胚胎培养后,将胚胎移植入代孕母体内,使其继续发育为新个体。
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